应用荧光标记通用引物检测微卫星是一种省成本、省时间、高效精确的基因型检测方法.本文介绍了该方法的基本原理和操作流程,并首次应用此方法检测鲤微卫星标记的基因型.结果显示,除位点HLJ179未检测到有效数据外,其它14个位点都采集到相应的基因型.该方法在鲤微卫星基因分型上的成功应用,为今后鲤大规模连锁分析提供了一种更经济有效的检测方法.

以亚东鲑为研究对象,测定分析了线粒体COI基因638bp碱基序列,探讨了该基因作为DNA条形码在鲑科三种鱼类(亚东鲑、大西洋鲑和红点鲑)鉴定方面的可行性和有效性.亚东鲑33个个体共享1种单倍型.利用Kimura-2模型分析得到亚东鲑与大西洋鲑遗传距离最小,为0.079;大西洋鲑与红点鲑遗传距离最大,为0.141;亚东鲑与红点鲑遗传距离为0.120.基于COI基因片段序列构建的NJ显示,亚东鲑和大西洋鲑首先聚到一起,然后再与红点鲑相聚.结果表明COI基因片段作为三种鱼类DNA条形码进行分类鉴定具有一定可行性.

用哲罗鱼的微卫星引物对哲罗鱼的2个微卫星位点进行PCR扩增.将扩增产物在变性与非变性聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)上电泳,银染后发现微卫星扩增产物在二者上的电泳结果存在明显差异.在非变性凝胶中存在较多非特异条带,而在变性凝胶中微卫星扩增产物条带清晰,易于鉴定.

在水温25.0±3.0℃下,在以不同比例的玉米蛋白、棉籽粕和豆粕为蛋白源、部分替代鱼粉的饲料中,按鱼粉的必需基酸组成添加晶体赖氨酸、蛋氨酸和精氨酸,配制成5种等蛋白(37.0%)和等脂类(11.0%)的饲料,在60 cm × 60 cm×120 cm的微流水网箱中饲养平均体质量14.84g,平均体长12.06cm的花(鱼骨)鱼种.实验饲料分别含鱼粉28.0%(F0,对照)、21.0%(F1)、14.0%(F2)、7.0%(F3)和0%(F4).100d的饲养中,花(鱼骨)成活率变化在98.67%-100%之间,各组之间差异不显著(P>0.05),但对生长和饲料利用率却有显著影响.花(鱼骨)特殊增重率随饲料中鱼粉替代比例的增加而降低,用植物蛋白替代25%(F1)的鱼粉,添加晶体氨基酸,鱼特殊增重率、免疫力和消化率最高,显著高于对照组(P<0.05),用植物蛋白替代50%(F2)和75%(F3)的鱼粉组鱼的特殊增重率与对照组差异不显著(P>0.05),但用植物蛋白全部替代(F4,100%)鱼粉,鱼的特殊增重率显著低于F2和F3组(P<0.05).根据Excel趋势预测曲线的二次曲线计算,当最大特殊增重率为0.585%时,相对应的鱼粉含量为22.77%,可以替代18.69%的鱼粉.植物蛋白替代鱼粉对鱼肌肉中水分和灰份含量无显著影响(P>0.05),但蛋白质、总氨基酸、必需氨基酸和脂肪的含量高于对照鱼.

采用3 × 3因子试验确定不同蛋白质和脂肪水平饲料对草鱼生长和鱼体组成的影响.初始平均体质量为0.75g的试验鱼放养在27个规格为85cm×35cm×95cm的网箱中,每箱放养50尾.日粮中的蛋白源、脂肪源和可消化碳水化合物源,分别采用鱼粉、豆油和糊精配制,日粮设3个粗蛋白水平,每个蛋白水平有3个能量水平饲养草鱼84d.结果表明MPLL组(粗蛋白为30%,粗脂肪为4%)的特殊生长率和蛋白质效率最高,饲料系数最低,但与LPML组(粗蛋白为25%,粗脂肪为6%)差异不显著;总的来看.脂肪含量在4%和6%时特定生长率和饲料系数以中蛋白质组(MP,30%)最高,脂肪含量在8%时特定生长率和饲料系数以低蛋白质组(LP,25%)最高,表明饲料脂肪水平对鱼的生长和饲料系数有显著影响.随着饲料可消化能的增加,鱼体的脂肪含量增加,而蛋白和灰分含量没有多大变化.综合饲料成本等因素,本试验初步确定草鱼幼鱼生长所需的最适蛋白水平为25%,DP/DE约为23.47mg·kJ-1.

以枝角类(Moina sp.)、水丝蚓(Limnodrilus sp.)、鲂鱼苗(Megalobrama smblycephala)、鱼苗宝(配合饲料)和枝角类+水丝蚓为开口饵料投喂鸭绿沙塘鳢仔鱼,经13d培育,结果表明:以枝角类+水丝蚓作为鸭绿沙塘鳢的开El饵料,仔鱼的生长速度最快,成活率最高,其平均体重、平均全长和平均成活率分别为21.37±8.44mg、12.58±1.11mm和88.33%;其中平均全长高于其它各组,差异显著(P<0.05);平均体重大于其它各组,与枝角类、鲂鱼苗、鱼苗宝(配合饲料)组差异显著(P<0.05);平均成活率高于其它各组,且与各组差异显著(P<0.05).鸭绿沙塘鳢仔鱼的最适开口饵料是枝角类+水丝蚓;其次为鲂鱼苗、水丝蚓和枝角类,鱼苗宝不适合作为其开口料.

本实验运用三种荧光染色方法对虹鳟精子的质量进行检测,并探讨荧光染色对虹鳟精子质量评价的可性及意义.在生殖季节采集虹鳟精液,分别进行Hoeehst33342/碘化丙啶双染,吖啶橙染色及罗丹明123/碘化丙啶双染,然后将其制成涂片荧光显微镜下观察.经荧光染色的虹鳟精子质膜完整,DNA完整,可明显分辨出活体和死亡精子,线粒体膜功能正常精子的比率分别为90.7%、98.7%和96.4%.综上所述,结合三种检测方法可以简便快速地测定虹鳟精子的质量.

本文研究了5个浓度(0、0.9 1.8、3.5、7mmol/L)的3种氮源(硝酸钠、氯化铵、尿素)对绿色巴夫藻(Pavlo-va viridis)生长代谢的影响.结果表明绿色巴夫藻在尿素浓度为3.5mmol/L时生长最快,最大细胞密度达30.927*106个细胞.氮源及其浓度显著影响绿色巴夫藻叶绿素a和蛋白质的含量,叶绿素a在3.5mmol/L尿素时,含量最高为0.913μg/106个细胞.蛋白质在7.0mmol/L尿素时,含量最高为36.698μg/106个细胞.脂肪酸主要由16:0、16:1、20:5组成,氮源浓度为1.8mmol/L NaNO3时,EPA和多不饱和脂肪酸含量最高,占总脂的37.31%和45.88%.

2009年7月,在牡丹江支流海浪河(斗银河至牡丹江入口,全长20kin)对浮游植物结构群落和水质状况进行了调查研究.结果显示:(1)海浪河夏季浮游植物共有8门32属113种及变种,其中以硅藻、绿藻为主,分别占46.49%、38.60%;(2)生物量在0.62～5.84mg·L-1之间,丰度变幅在64×105～22.09×105ind/L之间;(3)优势种以硅藻为主,从出现频度和优势度指标来看,短小舟形藻Navicula exigua,弧形蛾眉藻线性变种直变型C.arus var.lin-earis,箱形桥弯藻Cymbella cistula为主要优势种;(4)污染指示种共检出63种,其中β-中污带的种类最多,为21种,占所有检出污染指示种比例的33.33%;(5)基于优势度、生物量和丰度以及污染指示等级和国家水环境质量标准(CB3832-2002)综合评价,海浪河夏季整体水体呈中营养状态,达到国家水环境质量Ⅲ类水质标准.

研究了恩诺沙星对嗜水气单胞菌体外药效学.主要包括:最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)的测定、生长动力学曲线、杀菌动力学曲线、抗菌后效应、四种培养因子对恩诺沙星体外抑制嗜水气单胞菌活性影响的体外药效学研究.结果表明:MIC、MBC和MBC/MIC分别为0.16μg/mL、0.32μg/mL和2,嗜水气单胞菌在液体培养基中培养2h后进入对数期生长,大约持续10h;在用药4～8h时达到最大药效,由杀菌曲线可知恩诺沙星具有浓度依赖性;浓度为4MIC的抗菌后效应大于8MIC的对应值,但它们之间无显著差异(P>0.05);恩诺沙星对嗜水气单胞菌作用的最适pH值为7-8;二价阳离子(Mg2+)对恩诺沙星药效影响较大;随着Mg2+浓度增大,药效降低;血清可降低恩诺沙星的药效;细菌数量对其抗菌活性影响不显著.

2005年从松花湖采集了亚洲公鱼、大银鱼和太湖新银鱼样品进行了生物学测定,并参考有关资料论述了松花湖的自然条件及渔业概况,移入小型经济鱼类的主要生物学特性,种群发展的生态学分析和种群发展趋势及数量调控.

本文对鱼类育种实践中所采用的鱼类个体标记方法及其优、缺点进行了综述.鱼类个体标记主要有外标和内标两种方式,每种标记方式中又有不同的具体方法.外标法主要包括鼻签、剪鳍、挂牌、烙印等,具有简便易行、成本较低等优点,但标记的保留率相对较低;内标法有染料标记、放射性同位素标记、荧光色素可见标记和被动整合雷达标记等,内标法的标记保留率较高,但成本也较高.内标法在标记效率和个体存活率上比外标法要好.

鱼类循环水养殖是一种工业化的养殖方式,其主要特征是养殖水体的循环利用,这一过程要对养殖水体进行处理.对水质参数进行监测与控制,要涉及物理、化学、生物及控制理论等许多学科的理论与技术.本文列出了循环水养殖水体中影响鱼类生长的各种因子并总结了前人的研究成果,进而提出了一些水质参数的控制方式.其中着重分析了溶解氧、pH值和氨氮的监测与控制方式,为进一步实验研究奠定基础.