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›› 2010, Vol. 23 ›› Issue (2): 6-10.

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大麻哈鱼SRAP反应体系正交设计及优化

张慧,孙中武,刘伟,尹洪滨   

  1. 东北林业大学生命科学学院,黑龙江,哈尔滨,150040;中国水产科学研究院黑龙江水产研究所,黑龙江,哈尔滨,150070%东北林业大学生命科学学院,黑龙江,哈尔滨,150040%中国水产科学研究院黑龙江水产研究所,黑龙江,哈尔滨,150070
  • 收稿日期:2010-02-15 出版日期:2010-02-15 发布日期:2010-02-15
  • 通讯作者: 张慧

Orthogonal Design and Optimization of SRAP Amplification System for Oncorhynchus keta

ZHANG Hui,SUN Zhong-wu,LIU Wei,YIN Hong-bin   

  • Received:2010-02-15 Online:2010-02-15 Published:2010-02-15

摘要: 以大麻哈鱼基因组DNA为模板,利用相关序列多态性(SRAP)技术以及L25(56)正交试验和单因子试验方法,分析了不同浓度的TaqDNA聚合酶、引物、dNTPs、Mg2+、DNA模板对扩增结果的影响,最终确立的PCR最佳反应体系为15 μl,该体系含有1×PCRbuffer,TaqDNA聚合酶0.75U,引物浓度0.3 μmol/L,dNTPs浓度0.3mmol/L,Mg2+浓度2.5mmol/L,DNA模板100ng.利用此优化反应体系,获得了清晰、稳定、多态性高的DNA谱带.

关键词: 大麻哈鱼, SRAP, 正交设计, 单因子试验

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