摘要: 以大麻哈鱼基因组DNA为模板,利用相关序列多态性(SRAP)技术以及L25(56)正交试验和单因子试验方法,分析了不同浓度的TaqDNA聚合酶、引物、dNTPs、Mg2+、DNA模板对扩增结果的影响,最终确立的PCR最佳反应体系为15 μl,该体系含有1×PCRbuffer,TaqDNA聚合酶0.75U,引物浓度0.3 μmol/L,dNTPs浓度0.3mmol/L,Mg2+浓度2.5mmol/L,DNA模板100ng.利用此优化反应体系,获得了清晰、稳定、多态性高的DNA谱带.
中图分类号:
张慧;孙中武;刘伟;尹洪滨. 大麻哈鱼SRAP反应体系正交设计及优化[J]. , 2010, 23(2): 6-10.
ZHANG Hui;SUN Zhong-wu;LIU Wei;YIN Hong-bin. Orthogonal Design and Optimization of SRAP Amplification System for Oncorhynchus keta[J]. , 2010, 23(2): 6-10.