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›› 2010, Vol. 23 ›› Issue (3): 40-43.

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虹鳟胚胎组织单细胞悬液制备方法的研究

杨翟平,刘奕,龚丽,郑金霞,范兆廷   

  1. 东北农业大学水产养殖系,黑龙江哈尔滨,150030
  • 收稿日期:2010-03-15 出版日期:2010-03-15 发布日期:2010-03-15
  • 通讯作者: 杨翟平

Methods for Cell Suspension Preparation of Rainbow Trout Embryo

YANG Zhai-ping,LIU Yi,GONG Li,ZHENG Jin-xia,FAN Zhao-ting   

  • Received:2010-03-15 Online:2010-03-15 Published:2010-03-15

摘要: 采用0.01M PBS等渗液配制的浓度为70%的乙醇固定液对虹鳟活体胚胎进行固定,并以蒸馏水配制的浓度为70%乙醇固定液作为对照,探讨用于流式细胞术分析的胚胎组织单细胞悬液制备方法.实验结果表明:PBS-乙醇和蒸馏水-乙醇固定液均可获得分散良好的单细胞悬液,但蒸馏水-乙醇固定液制备的胚胎细胞悬液中细胞数量相对较少,细胞碎片明显增多,流式细胞仪检测GO/G 1峰较宽.而PBS-乙醇固定液制备的细胞悬液,细胞形态完整、背景较干净,细胞粘连少,几乎没有细胞碎片,流式上机检测各参数值较理想;以PBS-乙醇固定液制备2n虹鳟胚胎单细胞悬液作为材料检测,其结果与以红细胞为对照的样品检测DNA相对含量结果相一致,均为50AU.本研究表明利用PBS-乙醇固定液制备鱼类胚胎组织单细胞悬液方法是可行的.

关键词: 胚胎, 单细胞悬液, 流式细胞术(FCM), DNA含量

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